Победитель конкурса
"Молодые ученые"

Елизавета
Болдинова

Регуляция активности ДНК-полимераз человека репликативным фактором PolDIP2

03.00.00 Биологические науки


Курск


Институт молекулярной генетики Российской академии наук
Аспирантура, 4 курс, факультет: Лаборатория механизмов репликации поврежденной ДНК


Описание проекта

Репликация ДНК, содержащей повреждения, является сложным и не достаточно изученным процессом вследствие наличия множества перекрывающихся и конкурирующих механизмов, призванных во что бы то ни стало «пройти» поврежденный участок ДНК и завершить репликацию. Изучение функций белка PolDIP2 поможет лучше понять, как происходит регуляция активности специализированных ДНКП при столкновении с нерепарированными повреждениями ДНК. Регуляция активности ДНКП белком PolDIP2 может оказаться ранее не известным механизмом координации ДНКП с другими репликативными и репаративными факторами. Исследование механизмов регуляции работы транслезионных и репаративных ДНКП репликативным факторами, такими как PolDIP2, важно для понимания молекулярных механизмов поддержания стабильности генома, накопления мутаций и канцерогенеза, а также механизмов развития резистентности к препаратам химиотерапии. В результате реализации проекта будет разработана методика очистки PolDIP2 и проведены скрининговые исследования влияния PolDIP2 на активность транслезионных и репарационных ДНКП человека из разных семейств. Полученные данные будут обладать высокой новизной и научной значимостью, и позволяют лучше понять роль PolDIP2 в регуляции транслезионного синтеза и репарации.



Сейчас

Будет разработана методика выделения белка PolDIP2 с N-концевым SUMO-HIS тагом, что позволит повысить стабильность и растворимость белка и выделить PolDIP2 без дополнительных N-концевых аминокислот. С помощью ДНК-полимеразных реакций с радиоактивно-меченным ДНК субстратом будет проанализированы функциональные взаимодействия PolDIP2 с PrimPol и ДНК-полимеразами Pol κ, Pol ι, Pol η и Pol β. Для реализации проекта создан задел –получена экспрессионная конструкция с геном POLD2.